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Selección espermática: La lucha por la supervivencia (II) Agosto 24, 2009

Posted by munlait in Biotecnología, Educación, Investigación.
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Retomando : Selección espermática: La lucha por la supervivencia (I)

El Cervix: Nuevas dificultades

Mucus cervical: Bajo la influencia de los estrógenos femeninos, el cérvix, secreta un mucus altamente hidratado que excede el 96% de agua. Dicha hidratación, está relacionada con la penetrabilidad espermática, de tal manera que  cuanto más fluido sea, más fácilmente lo atravesaran los gametos masculinos.  Perecerán aquellos con pobre hidrodinámica

Respuesta inmune: La inseminación, estimula la migración de leucocitos, particularmente neutrófilos y macrófagos hacia el cérvix. Sin embargo, a este nivel y a diferencia de la vagina, los leucocitos no presentan una barrera significante para los espermatozoides con una motilidad normal, y se cree que su función principal, es la protección frente a microbios que puedan acompañar a los gametos masculinos. Además, IgG e IgA presentes en el cérvix están normalmente incrementadas en la fase folicular, pero decrecen en etapas cercanas a la ovulación.

Anatomía cervical: Por último, cabe mencionar que las criptas que presenta el cérvix, son lugares muy propicios para que los espermatozoides queden atrapados y que , si por una parte, dan lugar a una pérdida del número de gametos, también proporcionan un lugar de almacenamiento de los mismos, pudiendo permanecer  viables en dichos lugares, hasta 5 días tras la inseminación, y por tanto, ser capaces de salir, y fecundar el óvulo, días después del coito.

El útero

La cavidad del útero es relativamente pequeña, y los espermatozoides, pueden recorrerla en menos de 10 minutos a una velocidad de 5mm/min, que es su motilidad en medio acuoso. Además, son arrastrados por las contracciones del músculo uterino y asistidos por el mucus del cérvix, hasta llegar a la unión útero-trompas de Falopio.

Trompas de Falopio

El reservorio para los espermatozoides proporcionado a este nivel, se cree que es creado por la unión a carbohidratos de los epitelios que recubren las trompas de Falopio. Esta unión, conserva a los espermatozoides durante el almacenado.  Teóricamente,  los espermatozoides pueden liberarse de este epitelio, mediante una pérdida de los sitios de unión o bien por alteraciones en su membrana, para así llegar al óvulo para la fertilización. Por ello, se producen dos cambios fundamentales:

Capacitación: Conlleva una serie de cambios en la membrana plasmática del gameto masculino, que reduce la afinidad por el epitelio de las trompas a las que estaba unido y  prepara a éste para la reacción acrosómica y la fertilización

Hiperactivación: Cambios  en los movimientos flagelares que aumentan su amplitud. Esto, puede proporcionar la fuerza necesaria para sobrepasar la atracción entre el esperma y el epitelio y así liberarse. A veces, la hiperactivación, puede englobarse dentro de la capacitación.

Además de los cambios por parte de los espermatozoides, las señales hormonales de las hembras, que inducen la ovulación o incluso preovulatorias, pueden estimular al epitelio para favorecer la capacitación e hiperactivación.

Proximidades del ovocito

El impulso motor proporcionado por la hiperactivación de los espermatozoides, es un factor clave  para la llegada al ovocito y su penetración. Los fluidos presentes en el tracto final del recorrido, se tornan viscoelásticos por los que es necesaria una mayor fuerza para atrvesarlos, así como para sobrepasar la membrana del cúmulo oóforo. De esta manera, aquellos espermatozoides, con fallos en los mecanismos de capacitación o con una motilidad disminuída, no llegarán jamás a atravesar la zona pelúcida.

Otro factor clave cuando el gameto masculino, realiza la capacitación, es la dirección que toma. Los movimientos experimentados tras la hiperactivación, son vigorosos y erráticos y por ello, ha de existir un sistema de control, o guía que les conduzca hacia el ovocito. Existen por lo tanto, dos sistemas complementarios que funcionan como guía de los espermatozoides:

Sistema de termotaxis: Existe una diferencia de temperatura en diferentes secciones de las trompas de Falopio que conducen al gameto hacia el óvulo.

Sistema  de quimotaxis: En las proximidades del ovocito existen diversas sustancias que lo atraen hacia él, con mayor afinidad.

Continuará….

Bolas de siembra Mayo 10, 2009

Posted by munlait in Biotecnología, Ciencia, Investigación.
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Debido a los infructuosos intentos de clonación que me vienen ocupando desde hace algunos meses, me he visto en la obligación de hacer producciones a gran escala de esta tarea (a ver si así sale algún día). Ya no permito empezar una clonación un lunes/martes, y llegar a ver los NO resultados el viernes por lo que me dedico comenzar el proceso casi a diario juntándome con un montón de placas para sembrar. El otro día, me junté con unas 40 placas para sembrar y hoy tocarán más o menos lo mismo, pero ahora cuento con una pequeña ayuda. Uno de mis compis de laboratorio al ver tan desproporcionada siembra, me dijo….” Sara, ¿has sembrado alguna vez con bolas?” (que no en bolas xD) y me quedé lógicamente con cara boba porque nunca había oído hablar de esa técnica.( a lo mejor es común que la enseñen en biología, pero en farmacia, pues no )

Unos segundos más tarde, me trae una gradilla con tubos de vidrio y bolitas de cristal dentro a lo cual , lo primero que solté fue si eran bolitas para hacer pulseras o collares.. Pues resuuuuulta, que esas bolitas de vidrio y esterilizadas se ponen sobre la placa de cultivo con las bacterias previamente añadidas, bueno, sobre una placa no (que no merece la pena) sino sobre unas cuantas placas que se quieran sembrar (modo césped) y alé! A darle brio al asunto! Se colocan unas placas sobre otras y se agitan para que las bolitas de vidrio se impregnen con las bacterias y de esa forma se vaya extendiendo por toda la placa. Después, como las bolitas son reutilizables, pues las quitas de la placa, un poco de lejía, al autoclave, y hasta la próxima vez ;)

bolas

placas

Bien de tiempo me voy a ahorrar hoy en vez de sembrar con el asa….

Los del norte somos así de burros… Febrero 20, 2009

Posted by munlait in Ciencia, Investigación, Microscopía electrónica, Personal.
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Hace un par de semanas tuve mi primer contacto tutoreado en el microscopio electrónico, un bicho muy grande al que hay que tener mucho respeto. Ese día me explicaron como funicionaba todo…la cantidad de botones que tenía, aquellos a los que no podía tocar, aquello que costaba la releche, etc…en fin….que el miedo que tenía con el FPLC era pura tontería al lado de este.

La verdad es que me gustó mucho mirar las muestras con él. Está muy chulo poder ver, literalmente, tus proteínas :D

Hoy fue el segundo contacto con el micro…y bueno, ya que había recibido las primeras nociones…me las recordaron de nuevo y me dejaron un ratito a solas con él para intimar. Nada más salió mi compañero de la sala, muevo un par de cosillas y Plof! que se apaga la luz del filamento….asique ale! a llamar a la gente a ver qué había pasado. Como ese micro es un poco viejín, me dijeron que era normal, lo solucionaron y vuelta a empezar….cúal fué mi sorpresa al darle a encender al filamento y ver que seguía sin encender….asi que a volver a salir de la sala…

- “Sara…cómo has encendido el filamento?porqué está en esta posición?”

- ” Pues así….”

Nota: El interruptor del filamento es como una especie de manecilla de microondas numerada del 0 al 10 y que hay que girar en el sentido de 0 a 10

Nota2: Cuando se está en el micro, se está con las luces apagadas.

Y Sara mientras lo estaba diciendo, se dio cuenta que había girado el interruptor de 10 a 0.

A continuación vinieron las risas, la bronca por parte de la técnico que mantiene el micro…y los comentarios de que los del norte somos “un poco” brutos.

Pero os juro que no estaba tan fuerte como para suponer a oscuras que le estaba dando al sentido contrario!